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@关注牙齿的你,请收下这份“牙菌斑取样方法”
发布时间:2018-04-20 18:11   点击率:
若有人问小锐,你是什么时候知道微生物的厉害的呀?我肯定会回答,蛀牙疼的时候….

俗话说,牙疼不是病,疼起来真要命。为了揪住这要命的小细菌们,小锐这回可拼命了,终于寻得《牙菌斑取样方法》,分享给各位科研大大们,求大家帮小锐狠狠地虐一虐这些磨人的小妖精!


 
取样器材
 

 
取样位置&取样方法

I、龈上菌斑(位于牙龈缘以上的牙面)
取样牙齿
6颗index teeth:2颗磨牙(#3和#19);2颗前磨牙(#12和#28);2颗门牙(#9和#25)。

2颗磨牙:取右上#3和左下#19的第一磨牙。如果第一磨牙有未恢复的近中面(unrestored mesial surface),则取样。如果目标第一磨牙有恢复的近中面( restored mesial surface),而同一区域的第二磨牙具有未恢复的近中面,则取第二磨牙。如果两者都是恢复的近中面,则取第一磨牙。

2颗前磨牙:取左上#12和右下#28的第一前磨牙。取样规则与磨牙一致。

但如果第一前磨牙缺失,取剩余的前磨牙,无论是否近中表面恢复。

2颗门牙:取左上#9和右下#25门牙

附牙齿位置图
恒牙临床牙位


取样步骤
1. 用棉球隔离要采样的部位,并用气水注射器中的温和气流干燥。
2. 使用无菌Gracey刮匙刮取目标牙齿,尽可能多的刮取以获得足量样本。
3. 将刮匙头浸入buffer中4-5s,摩擦刮匙头和冻存管管壁,尽量清除刮匙头表面。
4. 对目标牙齿可重复取样,对其余目标牙菌斑取样,进行同上操作。
5. 拧紧盖子,摇晃4-5s,并做好标记。
6. 样品入袋并置于冰上,于4个小时内送回实验室进行抽提,如果不能抽提,尽快利用液氮速冻(一般速冻3-5min即可),并放入-80°冰箱中。
备注:如果牙菌斑过少,可以取更多磨牙(#14和#30)、前磨牙(#5和#21)。


II、龈下菌斑

取样牙齿
与龈上菌斑的牙齿相同。

取样步骤
a. 收集龈下标本之前,放置棉球,晾干该区域,并擦去残留的龈上菌斑。
b. 用无菌Gracey刮匙从选定的牙齿的颊侧表面收集龈下菌斑。
c. 将刮匙尖浸入冻存管中的缓冲液4-5秒。磨擦刮匙头和冻存管管壁,尽量清除刮匙头表面。如果样品不足,则可取对应位置的目标牙齿。
d. 拧紧盖子,摇晃4-5s,并做好标记。
e. 样品入袋并置于冰上,于4个小时内送回实验室进行抽提,如果不能抽提,尽快利用液氮速冻(一般速冻3-5min即可),并放入-80°冰箱中。

注:
1、如果在取样中,引起牙龈的大量出血,建议终止取样;
2、如果出血量很少,并且认为不影响实验,可继续取样。
3. 龈上菌斑和龈下菌斑放置在不同的冻存管。

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